蔡春芳 陈立侨 姜光明 宋学宏 叶元土 郭建明
摘 要 分别用虾蛄蛋白浆替代饲料中2%和4%的鱼粉，并以乌贼膏为对照，研究其对河蟹摄食和生长的影响。结果表明，饲料中添加虾蛄蛋白浆对河蟹的诱食作用与乌贼膏相当，但摄食量显著高于乌贼膏组。此外，虾蛄蛋白浆还具有明显的促进河蟹脱壳生长的作用，其作用机制可能与其中氨基酸、小肽、胆固醇等含量丰富有关。
关键词 河蟹；虾蛄蛋白浆；诱食剂
中图分类号 S985.2+2
Research on the effect of squilla protein plasma on food intake and growth of Chinese mitten crab
Cai Chunfang, Chen Liqiao, Jiang Guangming, Song Xuehong, Ye Yuantu, Guo Jianming
Abstract This study was to investigate the effect of squilla protein plasma on the food intake and the growth performance of Chinese mitten crab 2% and 4% fish meal in basic diet were substituted by squilla protein plasma respectively, and the cuttlefish meal was used as control. The attract activity of squilla protein plasma to crab was the same as the cuttlefish meal. However, the food intake of the crab fed with squilla protein plasma was higher than that with cuttlefish. Moreover, the squilla protein plasma improved exuviation and growth significantly, which might be related to the amino acids, short peptides and cholesterin that rich in squilla protein plasma.
Key words Chinese mitten crab（Eriocheir Sinensis）；squilla protein plasma；attractant
虾蛄(Squilla)属甲壳纲、口足目、虾蛄科,俗称螳螂虾、虾球弹或虾爬子。我国的虾蛄资源丰富,其中除部分个体大、鲜活的虾蛄被人类食用外,大部分用于制作三级鱼粉。由于这类鱼粉的甲壳含量高,加工工艺粗糙,加工过程中营养成分损失大,因而营养价值和市场价格都较低,没能充分发挥出应有的价值。
虾蛄蛋白浆是通过去壳、酶解、分离、浓缩、杀菌等过程而制成的，营养丰富而平衡,在酶解过程中能产生大量的小肽和氨基酸,可提高其消化吸收率,且某些小肽具有特殊的生理功能；此外，虾蛄蛋白浆有浓郁的虾、蟹香味,对鲫鱼具有良好的诱食作用[1]。
近年来河蟹养殖产量连续攀升，是淡水养殖品种中养殖效益较高的种类。河蟹夜间抱食的习性决定了它对饲料的诱食性要求较高，但目前市场上还没有河蟹专用的诱食剂。我们在河蟹诱食剂的研发过程中发现虾蛄蛋白浆对河蟹的摄食、脱壳、生长均具有良好的促进作用，本试验以此为出发点，探讨了虾蛄蛋白浆对河蟹摄食和生长的作用。
1 材料和方法
1.1 河蟹来源及养殖管理
河蟹购自苏州吴江某蟹种养殖场,驯养2周后分组。试验在室内循环养殖系统中进行,水族箱大小为100 cm×50 cm×50 cm。用于诱食活性评价试验的河蟹平均体重3.5 g,试验于9～11月间进行,恒温养殖,水温25 ℃;用于生长试验的河蟹平均体重2.4 g左右,试验在7～9月进行,水温平均28 ℃左右。水体溶氧均大于6 mg/l。
1.2 饲料
本试验所用的河蟹饵料配方如表1所示。根据中国饲料营养成分表(2005)计算可知试验基础料与乌贼膏在蛋白质含量及氨基酸组成上相似,其中精氨酸为第一限制性氨基酸。分别用虾蛄蛋白浆替代基础配方中2%和4%的鱼粉(均折算成干物质)作为试验饲料。

1.3 试验方法
进行诱食活性评价试验时将饲料制成湿式颗粒,基础饵料组饵料制成球形颗粒,其它组饵料制成椭圆形颗粒,粒径为0.5 cm左右。试验时以基础饵料作为对照,将对照组饵料与试验组饵料各10颗轻轻倒入放有10只河蟹的水族箱底部,集中于直径10 cm左右的范围内,饵料颗粒被拖至直径40 cm的区域外视作被摄食。每15 min观察1次剩余饵料数,共观察90 min。用投饵后60 min时观察到的剩余饵料数计算诱食指数。每个处理10个重复。1次试验完成后,用商品料投喂5 d后再进行下一次试验，以消除诱食剂对河蟹的影响。
诱食指数（%）=（试验饵料颗粒减少数-对照饵料颗粒减少数）/试验饵料颗粒投放数。
同时，比较河蟹对各组饲料摄食量的差异。每缸放养平均体重为3.5 g左右、规格一致并且刚刚经过1次脱壳的河蟹15只，每组4个重复。每天上午8：00投喂南瓜和玉米，下午6：00投喂试验饲料，适当过量投喂，于晚上9：00收集残饵,烘干合并。连续观察14 d，计算摄食量。
用于生长试验的饲料用绞肉机制粒，室温风干后再破碎过筛。每天上午8：00排污，同时收集蜕下的壳。每天投饵2次，适量投喂，上午9：00投三分之一，下午6：00投三分之二。饲养2个月，每5 d清点河蟹数量，修正脱壳数。
蜕壳数 = 某脱壳期内收集到的壳数/某次脱壳开始时蟹数×15（放养数）。
本次试验中，根据河蟹脱壳和存活情况，每15 d统计1次脱壳数。在饲养2个月后称量河蟹重，以成活河蟹数大于11个的处理组计算增重率。
1.4 数据处理
数据经方差分析后用Duncan's法进行新复极差检验，所有计算用SPSS 11.0进行。
2 结果
2.1 虾蛄蛋白浆的诱食活性（见表2）

由表2可见，虾蛄蛋白浆对河蟹具有诱食作用，其诱食活性随着在饲料中含量增加有所提高，但没有显著差异（P>0.05）；与乌贼膏组相比，其诱食活性也没有显著差异（P>0.05）。
2.2 虾蛄蛋白浆对河蟹摄食量的影响（见表3）

如表3所示,河蟹在14 d内摄食量以4%蛋白浆组最高,为29.7 g;其次是2%蛋白浆组,为29.1 g,并且这两组的摄食量显著高于乌贼膏组(24.6 g)(P<0.05)。基础料组河蟹摄食量为22.9,显著低于其它各组(P<0.05)。
2.3 虾蛄蛋白浆对河蟹蜕壳的影响（见图1）

由图1可见，在45 d内各组河蟹脱壳数差异不显著（P>0.05）。在60 d时，各组之间脱壳数差异增大，4%蛋白浆组最高，为54.9个；2%蛋白浆组其次，为51.7个；乌贼膏组和基础料组分别为38.8个和39.5个。统计分析后可知，60 d时，2%和4%虾蛄蛋白浆组的脱壳数显著高于乌贼膏组和基础料组（P<0.05）；2%蛋白浆组和4%蛋白浆组之间没有显著差异，乌贼膏组和基础料组之间也没有显著差异（P>0.05）。
从河蟹的增重率情况看，2%蛋白浆组最高，显著高于乌贼膏组，与4％蛋白浆组、基础料组差异不显著；乌贼膏组、4％蛋白浆组、基础料组之间差异不显著（P<0.05）（见表4）。

3 讨论
乌贼膏是虾蟹饲料中常用的诱食剂。由本试验结果可见，饲料中添加虾蛄蛋白浆对河蟹的诱食作用具有明显的正效应，其诱食活性与乌贼膏相似，但各蛋白浆组河蟹的摄食量显著高于乌贼膏组。
据报道,虾蛄蛋白浆粗蛋白含量在38%以上,其中赖氨酸3.10%、蛋氨酸1.00%、精氨酸3.39%[1]，营养丰富而均衡。虾蛄蛋白浆的主要生产工艺是去壳、酶解、分离、浓缩、杀菌。酶解过程中产生大量的小肽和氨基酸,而氨基酸和小肽已被公认为是引诱鱼类、甲壳类及其它水产动物采食的最有效的化合物之一。冷向军等报道,虾蛄蛋白浆对鲫鱼具有良好的诱食作用。冯健等[2]同样用酶解方法处理虾头并将其产物“虾肽”添加到南美白对虾日粮中,结果发现,“虾肽”可显著改善植物蛋白的适口性,提高南美白对虾对大豆蛋白的消化吸收功能,达到与鱼粉组相同的养殖效果,明显降低南美白对虾的日粮成本。因此,虾蛄蛋白浆对河蟹摄食的促进作用可能与其氨基酸和小肽含量丰富有关。
一般认为,甲壳动物个体的生长呈阶梯式，即在蜕皮时快速的生长,蜕皮之后至下一次蜕皮前,体重几乎很少增加[3]，脱壳是生长的结果[4]。因此，本文以河蟹脱壳数的差异来描述各组河蟹生长的差异。
尽管摄食量会影响甲壳动物的脱壳次数,但只有在低摄食水平时才会有显著差异,在饱食时这种影响不明显[5]。因此,本试验中河蟹蜕壳次数的差异可能来自于不同饲料营养成分的差异。第一，根据中国饲料营养成分表计算,本试验中基础饲料和乌贼膏组蛋白含量相等,第一限制性氨基酸均为精氨酸,蛋白价相等。优质鱼粉的精氨酸含量是3.91%、水分为11.5%,而虾蛄蛋白浆精氨酸含量为3.39%、水分为32.4%。当用相等干物质的虾蛄蛋白浆替代2%和4%的鱼粉时,饲料中的精氨酸水平就有所提高。氨基酸平衡性的改善可能是虾蛄蛋白浆组河蟹脱壳数显著高于乌贼膏组和基础料组的原因。第二,虾蛄蛋白浆组不仅氨基酸平衡性高,小肽含量也比较丰富[1]。与游离氨基酸的吸收相比,小肽转运系统具有转运速度快、耗能低、不易饱和的特点。研究发现，按理想氨基酸模式配制的纯合日粮获得的生长性能要比小肽组差[6]。虾蛄蛋白浆中的小肽可能对河蟹的脱壳生长也具有促进作用。第三,虾肉中胆固醇含量一般比鱼肉高,胆固醇是蜕皮激素的前体物质,这可能也是河蟹脱壳数提高的原因。
试验结果表明，虾蛄蛋白浆不仅可以促进河蟹脱壳，还能促进河蟹增重。2%虾蛄蛋白浆组增重率显著高于乌贼膏组，但4%虾蛄蛋白浆组增重率与基础饲料组和乌贼膏组相比差异不显著，这可能与试验结束前这1组河蟹相互残食有关。河蟹相互残食主要发生在脱壳期，4%蛋白浆组脱壳周期相对较短，在试验即将结束时又进入了新一轮脱壳期，这时候河蟹比较大，残食后对增重率的影响比较大。虽然试验结果显示的各组间存活率相近，但其它处理组河蟹数量的减少发生在试验前期，前期河蟹数量减少后，河蟹生活环境有所改善，有利于生长。这两方面的原因导致4%蛋白浆组增重率没有明显优势。换言之，排除存活率这个因素，4%蛋白浆对河蟹的生长性能具有显著的促进作用。
本试验可以得出，在饲料中添加2％～4%的虾蛄蛋白浆对河蟹具有明显的促进生长和脱壳的作用，其作用机制可能与其氨基酸、小肽、胆固醇等含量丰富有关。
参考文献
1 冷向军，李星星，李小勤,等. 虾蛄蛋白浆的生产工艺及诱食效果[J]. 水产科技情报，2005,32（3）：112～113
2 冯健,王明鹏. 虾肽诱食剂改善南美白对虾植物蛋白日粮的作用[J]. 海洋科学，2004，28：48～51
3 陈楠生,张新正,刘恒,等译. 对虾生物学[M]. 青岛:青岛海洋大学出版社,1992
4 王克行. 虾蟹类增养殖学[M]. 北京:中国农业出版社, 1997. 154～155
5 黄国强，董双林，王芳，等. 饵料种类和摄食水平对中国对虾蜕皮的影响[J]. 中国海洋大学学报，2004，34(6):942～948
6 李建鑫.小肽的营养及其在畜禽生产上的应用[J].氨基酸和生物资源，2006, 28 (1): 72～75

（编辑：徐世良，fi-xu@163.com）
蔡春芳，苏州大学生命科学学院，博士，副教授，215123，苏州市工业园区高教区横一路。
陈立侨，华东师范大学生命科学学院。
姜光明、宋学宏、叶元土、郭建明，单位及通讯地址同第一作者。
收稿日期：2007-05-08
★ 江苏省社会发展项目（编号BS2006021）；苏州市农业科技发展项目（编号SNZ-0223）；通威饲料有限公司资助