近年来，随着基因工程技术的发展，一些有生物活性的小分子多肽受到了高度的重视，国内外针 对小分子多肽的大量研究表明某些小肽在动物营养保健、生物制药和临床应用等方面有着广阔的前景。
但是由于其分子量小，在细胞中的稳定性不好，容易 被宿主蛋白酶识别并降解为无活性的寡肽片段[1]，另
外其表达量也少，在一定程度上制约了小分子多肽 的工业化生产。目前，采用构建多拷贝表达载体的 策略可以有效提高小分子多肽的表达量和稳定性。 Shang 等[2]分别构建了 2、4 和 8 拷贝的 K6W-泛素重 组表达载体，结果发现表达量随拷贝数的增加而增 加。多拷贝表达载体的构建方法主要有非对称粘性末 端互补法、接头连接法、同尾酶法和表达盒串联法 4 种，每一种的构建方法和适用范围各不相同，应根据 实际情况选择适合的方法构建多拷贝基因表达载体。 除此之外，也可采用含有卡那霉素抗性基因的表达 载体 pPIC3.5K 和 pPIC9K，通过增加的抗遗传霉素 抗性，
但是由于其分子量小，在细胞中的稳定性不好，容易 被宿主蛋白酶识别并降解为无活性的寡肽片段[1]，另
外其表达量也少，在一定程度上制约了小分子多肽 的工业化生产。目前，采用构建多拷贝表达载体的 策略可以有效提高小分子多肽的表达量和稳定性。 Shang 等[2]分别构建了 2、4 和 8 拷贝的 K6W-泛素重 组表达载体，结果发现表达量随拷贝数的增加而增 加。多拷贝表达载体的构建方法主要有非对称粘性末 端互补法、接头连接法、同尾酶法和表达盒串联法 4 种，每一种的构建方法和适用范围各不相同，应根据 实际情况选择适合的方法构建多拷贝基因表达载体。 除此之外，也可采用含有卡那霉素抗性基因的表达 载体 pPIC3.5K 和 pPIC9K，通过增加的抗遗传霉素 抗性，