我想表达一个10个氨基酸的小肽。利用pGEX-KG-GST表达其融合蛋白。我要如何操作将只有30个碱基的序列引入到我的空载体中呢？可以用普通的酶切回切连接嘛？但我担心碱基序列太小，酶切回收的效率会很差。请问如何解决呢？？谢谢大家？不知道你的小肽是用来干什么的一般最好在C端加个6HIS，这样酶切的时候，方便分离我是由来做底物肽的。不用切割下来我由普通的酶切连接的方法可以做嘛？最简单的办法就是设计合成小肽的编码基因单链，退火以后形成粘末端双链，与经过相应酶切回收的载体大片段连接后转化即可。几天就可以搞定。至于鉴定，可以通过设立载体自连转化培养平板为阴性对照来解决。如果需要直接酶切鉴定，可以在上下游寻找合适的酶切位点以便切出适当大小的片段来进行比较。已经构建成功，谢谢大家！谢谢ghos战友反馈信息，预祝后续试验顺利！以后常来蛋白版串门哦。 全球肽网客户