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发酵大豆蛋白中小肽的测定
发布日期:2010-11-30  来源:全球肽网  浏览次数:2435
1、原理:利用三氯醋酸作蛋白质沉淀剂,将发酵大豆蛋白中的蛋白质和肽链较长的肽沉淀,并将其中的短链小肽用酸溶解出来,经过滤、离心、消化、蒸馏,测定其蛋白质含量,并以其占样品粗蛋白质的百分数来表示含量。本方法是参照中华人民共和国轻工行业标准大豆肽粉标准(QB/ T 2653 -2004)基础上修订而来。2、试剂及仪器:1)100ml烧杯;2)10ml,50ml移液管;3)干过滤装置;4)半微量法或全量法粗蛋白质测定的试剂和装置;5)15%三氯醋酸溶液;6)4000 转/ 分钟的离心机。3、方法:准确称取样品6

1、原理:利用三氯醋酸作蛋白质沉淀剂,将发酵大豆蛋白中的蛋白质和肽链较长的肽沉淀,并将其中的短链小肽用酸溶解出来,经过滤、离心、消化、蒸馏,测定其蛋白质含量,并以其占样品粗蛋白质的百分数来表示含量。本方法是参照中华人民共和国轻工行业标准大豆肽粉标准(QB/ T 2653 -2004)基础上修订而来。2、试剂及仪器:1)100ml烧杯;2)10ml,50ml移液管;3)干过滤装置;4)半微量法或全量法粗蛋白质测定的试剂和装置;5)15%三氯醋酸溶液;6)4000 转/ 分钟的离心机。3、方法:准确称取样品6克于100 ml烧杯中,准确加入15 %三氯乙酸溶液50 毫升,混合均匀,静置5 分钟,以中速定性滤纸干过滤,弃去少许初始滤液,将滤液转移至离心管,在4000 转/ 分钟下离心10 分钟,准确移取其上清液10ml于消化管中,按半微量法(消化后定容至100ml,准确移取其中10ml进行蒸馏)或全量法粗蛋白质测定方法测定其粗蛋白质含量。同时做空白试验、测定样品的粗蛋白质的含量。4、结果与计算:小 肽%(半微量法)=(V1-V0)×C×6.25×0.014×10×5÷m×100%÷cp×100%小 肽%(全量法)=(V1-V0)×C×6.25×0.014×5÷m×100%÷cp×100% 式中: V1--馏出液消耗盐酸标准液的体积,ml;V0--空白试验消耗盐酸标准液的体积,ml;C--盐酸的摩尔浓度,mol/l;6.25×0.014--蛋白质转换系数;m--称取样品质量,g;cp—样品的粗蛋白质含量,%。重复性: A)、每个试样的两个平行样间允许相对偏差为其算术平均值的10%,以其算术平均值上报结果; C)、所得的结果是指小肽占粗蛋白质的百分含量。因其中含有无机氮,测得结果应减去无机氮,见非蛋白氮的测定。

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