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同位素修饰多肽

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产品/服务: 多肽修饰 
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所在地: 湖北 武汉市
有效期至: 2015-06-10 [已过期]
最后更新: 2014-06-18
浏览次数: 710
公司基本资料信息
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详细说明
检测抗多肽反应是否发生的最简单方法就是抗多肽ELISA。有两种技术可以将多肽链接到ELISA板上。第一种方法就是直接将多肽链接到盘上。但如果链接氨基酸恰好是抗原决定簇的一部分,则抗体无法和多肽进一步链接,这样产生假阴性结果的可能性增加。第二种方法则是先将多肽与载体蛋白耦合,然后将多肽-蛋白耦合体链接到ELISA盘上。这种链接方法会使抗体-多肽的结合成功率提高,因为多肽不是直接嵌入盘膜,因而会更加暴露给抗体。这种方法因而更可靠,可重复性更高。需要注意的是,用于该方法的载体蛋白必须不同于用于免疫耦合的载体蛋白。这样会避免血清中抗载体蛋白反应所导致的高背景反应。
     当做血清检测时,另一点需要记住的是,由于免疫多肽与自然多肽结构上的差别,检测时的抗多肽反应与试剂的抗多肽反应可能是不同的。任何检测,尤其是测定滴定量以决定收获点时,必须包括针对天然状态下蛋白的检测。当然可以做针对天然状态下蛋白的ELISA;但由于血清在不同检测体系中表现会不一样,因此最好在血清被日常使用的体系中进行蛋白识别鉴定。如果血清将用于免疫沉淀反应,就应该进行针对该反应的检测。
 产生具有优良性能的抗体。订购定制的连接多肽,这样您可以增加抗原的免疫原性。如果多肽小于6KD,我们特别推荐做连接。半抗原载体连接选择包括:
·         keyhole limpet hemocyanin (KLH)
·         bovine serum albumin (BSA)
·         thyroglobulin (THY)
·         ovalbumin(OVA)
    此外,您可以选择多抗原多肽(MAP)连接,它提供一个有分支的赖氨酸核心可替代的多种构型的合成多肽。在决定使用MAP技术还是传统的载体蛋白做连接时,请注意下列指导:
·         半光氨酸会形成非特异二硫键。如果您关注二硫键的构型,使用KLH
·         如果这种多肽是一直被成功地用来生产抗体,效仿已经使用的方法。
·         由于多肽通过C末端连接,而MAP技术有利于N末端或内部的多肽,不推荐使用在严格C末端连接的多肽上。连接载体也可能会导致一些空间障碍。使用KLHC末端连接。
·         由于在传统的C18 HPLC时,MAP多肽的性能更类似于大的蛋白,因而未提供纯化。
长度
    合适的多肽长度有利于优质合成,大部分的多肽抗原要求长度范围在12-16个残基,而且相对容易合成。尽管9个残基或更短的多肽已经是有效的抗原,但是长于12到16氨基酸的多肽可能包含几个决定簇。超过20残基的多肽开始提出了更大的合成挑战。

疏水残基
    当设计多肽时,请注意诸如Ala,Cys,Ile,Leu,Met,PheVal类残基,它们会增加出现多肽可溶性问题的概率。注意保持疏水残基低于50%
欢迎来订购多肽
手机号码:15972011437
Q Q号: 2969854522
公司电话: 027-87687993
公司传真: 027-87687992
电子邮件:luomc85@moonbiochem.com 
公司网址: http://www.moonbiochem.com
 
 
 
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